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2018年46卷7期

評述與進展
功能核酸生物傳感器檢測金屬離子的研究進展
杜再慧 , 李相陽 , 田晶晶 , 張洋子 , 田洪濤 , 許文濤
2018, 46(7): 995-1004. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171444
[摘要](623) [FullText PDF](129)
摘要:
功能核酸是具有特定結構和功能的天然或人工核酸序列。一些金屬離子是人體必需的微量元素,但過量的金屬離子會對人體健康帶來危害。功能核酸具有易于修飾、價格低廉、穩定性高、特異性強等優點,被廣泛應用于金屬離子的檢測。本文詳細介紹了功能核酸與金屬之間的相互作用,主要包括DNA/RNA切割型、連接型、錯配型、點擊化學型、構象改變型以及其它類型;以及功能核酸與不同信號輸出方式相結合的生物傳感器。最后討論了功能核酸在金屬離子檢測過程中的優勢以及現存的問題,對功能核酸生物傳感器未來的發展方向以及應用前景進行了展望。
二次離子質譜-激光掃描共聚焦顯微鏡聯用對單細胞顯微成像-原理及應用
邵長芳 , 趙耀 , 吳魁 , 賈菲菲 , 羅群 , 劉哲 , 汪福意
2018, 46(7): 1005-1016. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181110
[摘要](509) [FullText PDF](42)
摘要:
二次離子質譜(SIMS)分析主要用于半導體、地質等領域材料表面分析,隨著科學儀器技術的發展,近年來,SIMS在生命科學領域中得到了越來越廣泛的應用。SIMS可以實現對樣品表面的質譜分析、化學成像以及深度剖析。三維SIMS成像分析的橫向分辨率可達80~100 nm,縱向分辨率1~5 nm。但是,由于缺少特異性指示亞細胞結構的碎片離子,單細胞SIMS成像分析仍然面臨著諸多挑戰。激光掃描共聚焦顯微成像(LSCM)作為一種單細胞成像技術已日趨成熟,可以對單細胞中的熒光分子或者對熒光標記的目標分子、細胞器成像,獲得高分辨率亞細胞結構成像圖。因而,LSCM在單細胞形貌分析上的優勢和SIMS在單細胞化學成像方面的優勢可以有效互補,其聯合應用能顯著提升單細胞分析的應用范圍、深度和結果的準確性。本文重點介紹SIMS成像以及SIMS-LSCM聯用成像在單細胞成像研究中的應用進展,在總結、評述該領域代表性工作的同時,對SIMS-LSCM聯用成像在化學和生命科學研究,特別是在細胞生物學和藥物發現領域的應用前景進行了展望。
儀器裝置與實驗技術
單電極介質阻擋放電離子源的消電子技術研究
胡舜迪 , 劉其強 , 趙鵬 , 洪歡歡 , 史振志 , 周鎮宇 , 聞路紅
2018, 46(7): 1017-1024. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181158
[摘要](416) [FullText PDF](31)
摘要:
基于電場絕緣屏蔽技術的單電極介質阻擋放電離子源(DBDI),具有放電均勻、穩定、離子化能量高等優點,可實現對更大極性范圍樣品的快速檢測。較高的離子化能量也增大了質譜圖的背景噪聲水平,對部分弱極性、低沸點樣品的檢測信噪比不高。本研究發展了基于單電極DBDI體系的外置電極消電子技術,探討了外置針電極和外置金屬網的消電子機理及其檢測效果。結果表明,外置金屬網消電子技術顯著提高了部分弱極性樣品的檢測信噪比,異丙威、全氟辛酸、蘇丹紅Ⅲ的信噪比提升了5~6倍。基于該技術測定辣椒粉中蘇丹紅Ⅲ,回收率為83.7%~94.6%,相對標準偏差(RSD)為5.6%~9.0%,檢出限為23 mg/kg,滿足辣椒粉中蘇丹紅Ⅲ添加劑檢測分析的要求。外置金屬網消電子技術進一步提高了單電極DBDI對弱極性、低沸點、復雜樣品的檢測能力。
用于化妝品的固體進樣-半定量汞速測儀的研制
王博 , 劉霽欣 , 張曉紅 , 毛雪飛 , 丁蘭 , 那星
2018, 46(7): 1025-1031. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181105
[摘要](453) [FullText PDF](34)
摘要:
研制了基于汞(Hg)和碘化亞銅(CuI)顯色反應的固體直接進樣半定量汞速測裝置,由催化加熱爐、測汞管、空氣泵和拍照組件構成。采用101白色擔體作為CuI的吸附劑,通過固體直接進樣方式導入化妝品樣品,既可肉眼辨識Hg超標的顯色強度,又可利用智能手機的攝像和RGB分析軟件快速半定量分析化妝品中Hg含量。此裝置對Hg的檢出限為50 ng,線性范圍為50~2500 ng,線性回歸系數(R2)> 0.97,重復測定RGB值的RSD為6%(n=11)。對化妝品實際樣品的測定結果表明,本研究的儀器方法與《化妝品安全技術規范》(2015版)中汞分析儀法所得結果的相對偏差≤ 10%,分析時間在5 min內,方法快捷、方便、準確、直觀,可用于化妝品中Hg的現場快速篩查。
研究報告
碳納米材料修飾陽極電極對微生物燃料電池傳感器水體毒性檢測靈敏度的影響
余登斌 , 江嵐 , 王沛 , 李婷 , 董紹俊
2018, 46(7): 1032-1038. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171372
[摘要](336) [FullText PDF](40)
摘要:
微生物燃料電池(Microbial fuel cell,MFC)傳感器檢測水體毒性靈敏度偏低是阻礙其實際應用的瓶頸之一。本研究利用多壁碳納米管(MWNT)和導電炭黑(GCB)修飾石墨氈(GF),作為陽極電極啟動MFC傳感器。考察了碳納米材料修飾陽極電極對MFC傳感器電化學性能及水體毒性檢測靈敏度的影響。結果表明,GCB和MWNT修飾的電極比未修飾的電極內阻小,MFC的功率輸出由大到小的順序為:GCB/GF-MFC(2.63 W/m2)> MWNT/GF-MFC(2.56 W/m2)> GF-MFC(2.09 W/m2)。以3,5-二氯苯酚(DCP)作為模型毒物進行毒性檢測實驗,10 mg/L DCP對3個MFC毒性傳感器的平均抑制率為:MWNT/GF-MFC(31.8%)> GCB/GF-MFC(26.3%)> GF-MFC(20.1%),碳納米材料修飾陽極電極組裝MFC的毒性檢測靈敏度均有所提高,MWNT/GF-MFC靈敏度最高。本研究對MFC型傳感器在水污染預警中的實際應用研究提供了參考。
柔性石墨烯平面電極對多巴胺的靈敏檢測
董子杰 , 張璞 , 李社紅 , 羅紅霞
2018, 46(7): 1039-1046. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171425
[摘要](351) [FullText PDF](40)
摘要:
將化學氣相沉積(CVD)制備的石墨烯轉移到柔性的聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)上,構建了一種石墨烯平面電極(GPE)。通過恒電位法在GPE表面修飾金納米顆粒(AuNPs),得到金納米顆粒修飾石墨烯平面電極(AuNPs/GPE)。用掃描電子顯微鏡(SEM)、能譜儀(EDS)、高分辨透射電子顯微鏡(HR-TEM)、X射線衍射(XRD)和拉曼光譜對此電極進行了表征。在AuNPs/GPE上,多巴胺(DA)呈現出一對良好的氧化/再還原峰。從而構建了一種新型DA傳感器。DA濃度在0.1~150.0 μmol/L和150.0~400.0 μmol/L范圍內,傳感器響應電流與DA濃度分段呈現良好的線性關系,檢出限為3.9 nmol/L(S/N=3)。此傳感器具有響應時間短、穩定性良好、抗干擾能力強、制作成本低、制備簡單等優點。
Fe3O4/MnO2摻雜石墨烯基分子印跡雜化材料用于水環境中17β-雌二醇的電化學傳感檢測
李穎 , 徐文凱 , 李蘋 , 朱小雪 , 黃艷鳳 , 張紀梅
2018, 46(7): 1047-1054. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171195
[摘要](304) [FullText PDF](33)
摘要:
采用可逆加成-斷裂鏈轉移(Reversible addition fragmentation chain transfer,RAFT)分子印跡技術,以內分泌干擾物17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)作為模板分子,以甲基丙烯酸(Methacrylic acid,MAA)為功能單體,二乙烯基苯(Divinyl benzene,DVB)為交聯劑,Fe3O4/MnO2摻雜的石墨烯(RGO)為載體,成功制備了Fe3O4/MnO2摻雜石墨烯基分子印跡雜化材料(Fe3O4/MnO2[email protected]),構建了基于Fe3O4/MnO2[email protected]修飾電極的分子印跡電化學傳感器。研究結果表明,Fe3O4/MnO2[email protected]修飾電極對17β-E2的線性響應范圍為4.0 nmol/L~0.8 μmol/L(R=0.9852),檢出限為47.2 pmol/L(3σ),相對標準偏差(RSD)為2.1%~2.5%。本研究為水環境中痕量17β-E2的特異性識別檢測提供了一種簡單、高效、經濟的分析方法。
基于氧化石墨烯-納米鎳修飾電極的化學耗氧量即時檢測系統
馮艷 , 王濟奎 , 張寶劍 , 孫倩雯 , 李曉璐 , 張之翼 , 唐美華 , 陳國松
2018, 46(7): 1055-1061. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181031
[摘要](370) [FullText PDF](51)
摘要:
建立了一套流動態下即時測定化學耗氧量(COD)的電化學分析系統。以GO-NiNPs修飾的平面電極與3D打印薄層流通池構成檢測模塊,微型蠕動泵驅動試液流經電極表面,采用計時電流法進行測定。考察了修飾材料、介質和電化學操作條件對電極表面形態及分析性能的影響。此裝置對COD的響應時間為1.5 min,樣品用量約2 mL。在低濃度區間的線性響應范圍為0.15~100 mg/L,線性方程i(μA)=3.974c(mg/L)+0.2295,相關系數R=0.9991,檢出限0.04 mg/L;在高濃度區間的線性響應范圍為100~450 mg/L,線性方程i(μA)=1.938c(mg/L)+230.9,相關系數R=0.9877。此系統對典型環境水樣的測定結果與國標GB11914-89法測定結果間相關性良好,而耗時僅為其1/100,且無需使用任何貴重及毒害性試劑,避免了二次污染,具有良好的便攜性。
以碳量子點為過氧化物模擬酶的葡萄糖測定方法
鐘青梅 , 黃欣虹 , 覃慶敏 , 蘇安梅 , 陳羽燁 , 劉馨宇 , 王益林
2018, 46(7): 1062-1068. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171396
[摘要](551) [FullText PDF](48)
摘要:
以煙炱為原料制備水溶性碳量子點(CQDs),此碳量子點具有過氧化物模擬酶活性,可催化H2O2氧化3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)產生顯色反應,而葡萄糖氧化酶(GOx)可催化葡萄糖氧化產生H2O2,基于上述原理,建立了一種以CQDs為過氧化物模擬酶的葡萄糖測定方法。以TMB為底物,研究了溫度、pH值等條件對催化性能的影響。結果表明,pH 3.5、35℃、0.5 mmol/L TMB、1 μg/mL CQDs時,此方法檢測葡萄糖的線性范圍為0.025~0.40 mmol/L,檢出限為5.10 μmol/L(S/N=3),尿液中的常見干擾物不干擾測定。實際尿液中的加標回收率為95.0%~105.1%。
功能化磁性納米粒子聯合質譜技術用于金屬硫蛋白的富集及鑒定研究
何新宇 , 王冰 , 周洋洋 , 卞曉軍 , 顏娟
2018, 46(7): 1069-1076. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171285
[摘要](373) [FullText PDF](41)
摘要:
金屬硫蛋白(Metallothionein,MT)是一種具有結合金屬能力和高誘導特性的低分子量蛋白質,因此常被作為一種重要的生物標志物用于水環境重金屬污染評估。傳統的金屬硫蛋白富集檢測方法耗時較長,操作復雜。本研究制備了金包覆四氧化三鐵的核殼納米粒子(Fe3O4@Au NPs),具有磁場的快速響應和特殊的光學特性的優點,并且可利用Au-S的強親和力實現納米粒子對金屬硫蛋白的快速富集,進一步將純化的蛋白質通過基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI-TOF/MS)進行分析檢測。結果表明,Fe3O4@Au納米粒子可以直接從復雜的溶液中富集MT,采用MALDI-TOF/MS鑒定分析,檢出限達10 fg/mL。
二硫化鉬量子點熒光傳感器檢測鹽酸多西環素的研究
姜相宇 , 付華 , 張敏 , 付志博 , 王月榮 , 章弘揚 , 胡坪
2018, 46(7): 1077-1083. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171347
[摘要](496) [FullText PDF](40)
摘要:
通過水熱法一步合成了二硫化鉬(MoS2)量子點。MoS2量子點具有良好的熒光性能,基于鹽酸多西環素(DOX)對MoS2量子點熒光猝滅的特性,建立了基于MoS2量子點熒光傳感器測定DOX含量的方法。研究結果表明,DOX對MoS2量子點熒光的猝滅機理為靜態猝滅。此熒光傳感器測定DOX的線性范圍為0.86~55.40 μg/mL,檢出限為0.023 μg/mL(S/N=3)。利用此方法對鹽酸多西環素片劑和加標牛奶中的DOX含量進行測定,RSD < 5%(n=3),測定結果與高效液相色譜法(HPLC)相比,相對誤差 < ±5%(n=3)。本方法快速、簡便,可用于實際樣品中鹽酸多西環素的測定。
基于雙極性離子阱內質子轉移反應的多肽離子電荷調控方法研究
葉似劍 , 龔曉云 , 李明 , 劉大軍 , 江游 , 方向
2018, 46(7): 1084-1088. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171422
[摘要](344) [FullText PDF](20)
摘要:
電噴霧是質譜分析多肽和蛋白質等生物分子時最常用的離子化技術。電噴霧產生的多肽和蛋白質離子通常帶有多電荷,從而產生多個譜峰,導致譜圖復雜。通過氣相離子/離子間的質子轉移反應可以有效調節經電噴霧離子化后蛋白和多肽等生物大分子的電荷價態,簡化譜圖,對于復雜蛋白和多肽生物樣品的分析具有重要意義。本研究通過研制的一套雙極性離子阱質譜裝置,利用阱內正、負離子間的質子轉移反應,實現了多肽離子的電荷調控。以氧化型谷胱甘肽、縮宮素、強啡肽分子作為典型樣品對方法的檢測效果進行了驗證。結果表明,此方法可去除多肽正離子中多余的正電荷,當注入足夠的負離子進行反應時,可以將帶多個電荷的多肽陽離子的價態降至最低,從而有效簡化譜圖。
納米金輔助介質阻擋放電離子化質譜分析法在獸藥飼料快檢中的應用
趙鵬 , 劉云 , 洪歡歡 , 聞路紅 , 史振志 , 張新榮 , 張四純 , 李學軍
2018, 46(7): 1089-1094. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181099
[摘要](285) [FullText PDF](20)
摘要:
介質阻擋放電離子化質譜分析法具有無需復雜樣品前處理、分析速度快等優點,可實現樣品原位、高效檢測,成為質譜分析領域的熱點技術。本研究提出了一種基于納米金輔助紙基進樣方式的介質阻擋放電離子源-質譜(DBDI-MS)聯用技術,實現了氟甲喹、二甲氧芐啶、替硝唑、地美硝唑共4種獸藥的快速檢測。結果表明,在氦氣流量為2.5 L/min、離子源溫度為200℃等最優實驗條件下,4種獸藥檢測信號強度均比無納米金輔助時提高了8~31倍。4種獸藥樣品在各自的濃度范圍內有較好的線性關系,相關系數(r)為0.952~0.996,且在飼料基質中的加標回收率為79.4%~96.5%。本方法能快速檢測獸藥飼料,具有靈敏度高、檢測費用低、實用性好等優點,所得結果基本滿足農業部限定標準要求,適合現場檢測,在飼料質量控制方面具有較好的應用前景。
基于DNA雜交鏈式反應和雜交空位的無標記熒光檢測DNA研究
徐杰 , 林濱 , 王亞 , 徐志愛 , 程桂英 , 張文
2018, 46(7): 1095-1101. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181142
[摘要](388) [FullText PDF](38)
摘要:
基于DNA雜交鏈式反應(Hybridization chain reaction,HCR)的信號放大策略,通過在參與HCR反應的發夾型DNA中設計一個特殊堿基,HCR反應后,該堿基對位出現雜交空位,利用雜交空位與熒光小分子(2-Amino-5,6,7-trimethyl-1,8-naphthyridine,ATMND)特異性結合產生的熒光淬滅效應,構建了一種無標記、無酶、靈敏的DNA檢測體系。利用凝膠電泳和原子力顯微鏡等對目標DNA引發兩個發夾型DNA交替自組裝形成的超級長鏈進行了表征。通過對雜交鹽濃度和ATMND濃度等條件的優化,獲得了滿意結果。相比于未利用此放大信號策略的分析方法,靈敏度提高了兩個數量級,目標DNA濃度在5.0~72.7 nmol/L濃度范圍內與熒光比值(F/F0)呈現良好的線性關系,檢出限為2.0 nmol/L。
固相萃取法測定水中短鏈氯化石蠟
王迎軍 , 王亞韡 , 江桂斌
2018, 46(7): 1102-1108. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181008
[摘要](367) [FullText PDF](44)
摘要:
建立了固相萃取法結合氣相色譜-低分辨率電子捕獲負化學源質譜(GC/ECNI-MS)測定水樣中短鏈氯化石蠟(SCCPs)的方法。選取了4種不同填料的商品化固相萃取柱,對淋洗溶劑、洗脫溶劑、洗脫溶劑體積等實驗參數進行了優化。經過優化的實驗條件為:Agilent Bond Elut-C18固相萃取柱分別用3 mL正己烷、3 mL甲醇、3 mL Milli-Q純水預淋洗并活化,上樣后,用3 mL 10%(V/V)甲醇淋洗,3 mL正己烷-二氯甲烷(1:1,V/V)洗脫。本方法的檢出限和定量限分別為18 ng/L和60 ng/L。1 μg/L加標水平下回收率為90%~130%,相對標準偏差低于±10%。采用本方法對北京20個水體樣品中的短鏈氯化石蠟水平進行了測定,濃度范圍為<LOD~682 ng/L,在檢測到SCCPs的18個樣品中SCCPs的均值為216 ng/L。
質子轉移反應-飛行時間質譜檢測呼出氣體中痕量揮發性有機物
韓明聰 , 董俊國 , 彭真 , 徐麗 , 程平 , 周振
2018, 46(7): 1109-1115. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171532
[摘要](309) [FullText PDF](45)
摘要:
通過對自主研制的質子轉移反應飛行時間質譜(PTR-TOF-MS)進樣口的改造,實現了對呼出氣體的實時、在線定量檢測,并對23名志愿者(11名男性健康受試者、11名女性健康受試者和1名胃病患者)的呼出氣體進行28天的實時在線監測。結果表明,健康人群呼出氣體中主要的揮發性有機物(VOCs)為甲醛、丙烯、乙醛、丙酮、異丙醇和異戊二烯等,濃度基本服從對數正態分布,且甲醛、丙烯、異丙醇主要集中在40~100 ppb濃度范圍內,乙醛的濃度主要集中在80~180 ppb濃度范圍內,丙酮主要集中在500~1500 ppb濃度范圍內,異戊二烯主要集中在8~20 ppb的濃度范圍內;呼出氣體濃度在性別上也存在差異,其中,受試人群中男性呼出氣體中丙酮的濃度高于女性,而乙醛和異丙醇濃度低于女性。胃病患者的呼出氣體中甲醛和丙酮含量明顯高于健康人群;乙醇和乙醛是飲酒者呼出氣體的主要標志物,乙醛是乙醇的代謝產物,隨著乙醇濃度的變化而變化。
基于時間分辨免疫分析的冰毒檢測微流控芯片
孫敬敬 , 宋祺 , 牟穎
2018, 46(7): 1116-1121. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181216
[摘要](358) [FullText PDF](34)
摘要:
研制了一種聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane,PDMS)-多聚賴氨酸(Poly-l-lysine,PLL)玻片雜合微流控芯片,每張芯片有24條反應通道,每條反應通道體積僅為2.5 μL,實現了基于時間分辨免疫分析技術的高通量冰毒(Methamphetamine,MET)定量檢測。此芯片利用PDMS和PLL對蛋白質的吸附特性在反應通道內表面固定冰毒完全抗原(MET-BSA),使其與待測樣品中的冰毒抗原(MET-Ag)共同競爭標記有冰毒抗體(MET-Ab)的乳膠微球。乳膠微球表面標記了鑭系元素,在紫外光的照射下會發出紅色熒光,根據競爭法檢測原理,冰毒濃度越高,與反應通道內表面冰毒完全抗原結合的乳膠微球數量越少,所發出熒光強度越低。本芯片的結果讀取采用紫外照射熒光成像方法,僅需對芯片拍攝熒光圖像,即可實現24個樣本的同時檢測分析。本方法樣品消耗量少,通量大,可以在100~3000 ng/mL濃度范圍內實現對冰毒的定量檢測,可用于緝毒的初步篩查,具有較好的應用前景。
基于激光誘導擊穿光譜的微生物種類鑒別研究
饒剛福 , 黃林 , 劉木華 , 陳添兵 , 陳金印 , 羅子奕 , 許方豪 , 楊暉 , 何秀文 , 周華茂 , 林金龍 , 姚明印
2018, 46(7): 1122-1128. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171448
[摘要](432) [FullText PDF](22)
摘要:
建立了激光誘導擊穿光譜(Laser induced breakdown spectroscopy,LIBS)全光學診斷方法,對微生物種類進行快速鑒別。制取10種微生物樣品,優選濾紙為富集載體,采集等離子體羽時間演變形貌圖及LIBS光譜指紋圖分析了鑒別微生物種類的可行性;運用九點平滑(Nine smooth,9SM)、多元散射校正(Multiple scatter correction,MSC)對波長范圍200~420 nm和560~680 nm微生物LIBS全譜數據進行了預處理;分析比較了主成分分析(Principal component analysis,PCA)、隨機森林結合主成分分析(Random forest combined with principal component analysis,PCA-RF)兩種方法對微生物種類的鑒別結果。結果表明,運用一定的數據預處理方法,采用PCA-RF算法對10類微生物種類鑒別,訓練集總準確率為99.6%,預測集總準確率為96.7%,說明選擇合適的LIBS光譜預處理及模型構建方法,對微生物種類的快速準確鑒別具有可行性。
酶級聯反應放大策略用于靈敏檢測酸性磷酸酶
李蘋 , 董玉明 , 王光麗
2018, 46(7): 1129-1136. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181038
[摘要](542) [FullText PDF](38)
摘要:
構建了一個新型酶級聯反應體系用于靈敏檢測酸性磷酸酶(ACP)。焦磷酸根離子(PPi)與Fe3+有很強的結合作用,阻礙了具有模擬過氧化物酶活性的普魯士藍納米粒子(PBNPs)的生成。ACP可將底物PPi水解為PO43-,從而釋放出Fe3+。釋放的Fe3+與亞鐵氰化鉀(K4[Fe(CN)6])形成PBNPs,PBNPs可以催化過氧化氫(H2O2)產生羥基自由基(·OH),進而催化氧化特征底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB),使體系產生明顯的顏色變化,同時伴隨吸光度的變化。基于上述原理,構建了一種靈敏檢測ACP的方法。結果表明,在3~20 U/L的濃度范圍內,氧化TMB(oxTMB)的吸光度與ACP濃度呈較好的線性關系,檢出限為0.8 U/L。本研究中,通過天然酶的催化反應產生納米材料模擬酶構建的酶級聯催化反應體系具有高效的信號放大作用,有望在生物傳感領域發揮重要作用。
植物樣品中低水平鈾同位素分析
魯彤 , 侯小琳 , 張路遠 , 陳寧 , 張偉超 , 王妍蕓
2018, 46(7): 1137-1144. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.181098
[摘要](287) [FullText PDF](25)
摘要:
建立了一種植物樣品中痕量鈾同位素(238U、235U和234U)的分析方法。通過高溫灰化去除植物樣品中有機質,采用混合酸消解樣品灰分,應用UTEVA萃取色譜分離和純化鈾。化學分離過程中鈾的回收率達94%,對Na、K、Ca等基體和干擾元素的去除率超過99%。用高靈敏度ICP-MS/MS同時測定了3種天然鈾同位素含量,對 238U、235U、234U的檢出限分別為3.05、0.34和0.04 pg/g,其中對238U和235U的檢出限比文獻報道值低1個數量級。對小麥粉標準參考物質中238U的分析結果與參考值吻合,表明本分析方法可靠。將本方法應用于中國西安地區植物樣品中鈾同位素的分析,結果表明,該地區植物中鈾含量和鈾同位素比值處于天然水平,未發現人為鈾污染。這是中國植物樣品中3種天然鈾同位素水平的首次調查。
硫化氫信號分子與L-乳酸脫氫酶蛋白相互作用機制的研究
朱艷雯 , 劉玲 , 孫瑋潔 , 顏廷才 , 檀德宏 , 張瑤 , 白冰
2018, 46(7): 1145-1151, 1159. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171510
[摘要](461) [FullText PDF](23)
摘要:
硫化氫(H2S)作為信號分子與目標蛋白相互作用而實現信號傳導機制的研究一直是研究熱點。本研究以L-乳酸脫氫酶為目標蛋白,選用3種H2S供體試劑(NaHS、Na2S、PS),采用分子熒光實時監測L-乳酸脫氫酶活性變化,研究H2S與目標蛋白的相互作用。SDS-PAGE電泳結果顯示,H2S不是通過形成二硫鍵/三硫鍵的方式與L-乳酸脫氫酶蛋白相互作用;圓二色譜結果表明,L-乳酸脫氫酶的二級結構發生變化,提示H2S可能存在半胱氨酸巰基衍生能力,以硫烷硫存在的PS具有最強的巰基作用力;MALDI-TOF-MS/MS分析結果表明,L-乳酸脫氫酶蛋白中部分半胱氨酸巰基位點發生了硫烷化,進一步揭示了H2S是通過與活性半胱氨酸巰基位點硫烷化的方式與L-乳酸脫氫酶發生作用。
梅花鹿茸快速生長及骨化期相關差異表達蛋白分析
幺寶金 , 張梅 , 劉美辰 , 王群 , 劉宇昕 , 趙雨
2018, 46(7): 1152-1159. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.171394
[摘要](252) [FullText PDF](18)
摘要:
采用同位素標記相對定量(iTRAQ)技術、超高效液相色譜-質譜聯用技術和生物信息學分析方法對東北梅花鹿快速生長期(60 d)與骨化期鹿茸(90 d)進行比較蛋白質組學研究,共鑒定出127種差異蛋白。與骨化期鹿茸比較,快速生長期鹿茸中顯著上調的差異蛋白80種,顯著下調差異蛋白47種,這些差異表達蛋白主要分布在細胞外基質、核小體、珠蛋白-血紅蛋白復合物、肌動蛋白絲、內質網-高爾基中隔室、內質網官腔及核內膜等部位。快速生長期鹿茸顯著上調的差異蛋白主要是參與血氧運輸、神經生長和再生、軟骨和骨組織發育及ATP合成的功能蛋白,而顯著下調的差異蛋白主要為參與軟骨內骨化過程的功能蛋白,這些蛋白在鹿茸不同生長時期表達量的變化與鹿茸的快速生長和骨化進程密切相關。本研究為系統揭示鹿茸快速生長及骨化的分子機制提供了基礎數據,同時對研究鹿茸的藥效物質基礎及臨床應用具有重要的指導意義。
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